زیادہ تر سیلولر اجزاء بے رنگ ہوتے ہیں اور انہیں خوردبین کے نیچے واضح طور پر پہچانا نہیں جا سکتا۔ فلوروسینس مائکروسکوپی کی بنیادی بنیاد رنگوں کے ساتھ اجزاء کا داغ لگانا ہے۔
فلوروسینٹ رنگ، جسے فلوروفورس یا فلوروسینٹ رنگ بھی کہا جاتا ہے، وہ مالیکیول ہیں جو دی گئی طول موج (عام طور پر UV) کی جوش کی روشنی کو جذب کرتے ہیں اور تھوڑی تاخیر کے بعد لمبی طول موج کی روشنی خارج کرتے ہیں۔ جذب اور اخراج کے درمیان تاخیر نہ ہونے کے برابر ہے، عام طور پر نینو سیکنڈز کی ترتیب پر۔
اس کے بعد خارج ہونے والی روشنی کو جوش کی روشنی سے فلٹر کیا جا سکتا ہے تاکہ فلوروفور کے مقام کو ظاہر کیا جا سکے۔
فلوروسینس مائکروسکوپی نمونے کو روشن کرنے کے لیے زیادہ تیز روشنی کا استعمال کرتی ہے۔ یہ روشنی نمونے میں فلوروسینٹ مواد کو اکساتی ہے، جو پھر لمبی طول موج پر روشنی خارج کرتی ہے۔
نتیجے میں آنے والی تصویر دوسرے روشنی کے منبع یا فلوروسینٹ مادے کے اخراج کی طول موج پر مبنی ہے جو روشنی کے علاوہ اصل میں نمونے کو روشن کرنے اور پرجوش کرنے کے لیے استعمال ہوتی ہے۔
پروسیسنگ
اتیجیت طول موج پر روشنی معروضی عینک کے ذریعے نمونے پر مرکوز ہوتی ہے۔ نمونے کے ذریعے خارج ہونے والے فلوروسینس کو معروضی عینک کے ذریعے پکڑنے والے پر مرکوز کیا جاتا ہے۔ چونکہ زیادہ تر جوش کی روشنی نمونے کے ذریعے منتقل ہوتی ہے، اس لیے صرف منعکس شدہ اتیجیت روشنی خارج ہونے والی روشنی کے ساتھ مقصد تک پہنچتی ہے۔
فارم
"فلوروسینس مائیکروسکوپی" سے مراد کوئی بھی خوردبین ہے جو تصاویر بنانے کے لیے فلوروسینس کا استعمال کرتی ہے، چاہے یہ ایک آسان ڈیوائس ہو جیسے ایپی فلوروسینس مائکروسکوپ، یا زیادہ پیچیدہ ڈیزائن جیسا کہ کنفوکل مائکروسکوپ، جو بہتر ریزولوشن حاصل کرنے کے لیے آپٹیکل سیکشننگ کا استعمال کرتا ہے۔ فلوروسینس تصویر۔
استعمال ہونے والی زیادہ تر فلوروسینس خوردبینیں ایپی فلوروسینس مائکروسکوپ ہیں، جہاں فلوروفورس کی حوصلہ افزائی اور فلوروسینس کا پتہ لگانے کو اسی نظری راستے (یعنی معروضی لینس کے ذریعے) سے مکمل کیا جاتا ہے۔
