a کے مخصوص اجزاءفلوروسینس خوردبینہیں:
فلوروسینٹ رنگ (فلوروفورس)
فلوروفور ایک فلوروسینٹ مرکب ہے جو روشنی سے پرجوش ہونے پر دوبارہ روشنی خارج کرتا ہے۔
فلوروفورس میں عام طور پر کئی بانڈڈ آرومیٹک گروپ ہوتے ہیں، یا کئی π بانڈز کے ساتھ پلانر یا سائیکلک مالیکیول ہوتے ہیں۔
بہت سے فلوروسینٹ رنگوں کو بہت سے بائیو مالیکیولز کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے۔
ان میں سے کچھ چھوٹے مالیکیولز ہیں جو فطری طور پر فلوروسینٹ ہوتے ہیں اور دلچسپی کے بائیو مالیکیول کو باندھتے ہیں۔ ان کی اہم مثالیں نیوکلک ایسڈ کے داغ ہیں جیسے DAPI اور Hoechst، phalloidin، جو ممالیہ کے خلیوں میں ایکٹین کے ریشوں کو داغدار کرنے کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔
روشنی کا ذریعہ
روشنی کے ذرائع کی چار اہم اقسام استعمال کی جاتی ہیں، بشمول زینون آرک لیمپ یا مرکری لیمپ جن میں ایکسائٹیشن فلٹرز، لیزرز، اور ہائی پاور ایل ای ڈی شامل ہیں۔
لیزر بنیادی طور پر جدید ترین فلوروسینس مائیکروسکوپی تکنیک میں استعمال ہوتے ہیں، جبکہ زینون لیمپ، مرکری لیمپ اور ڈیکروک ایکسائٹیشن فلٹرز والے ایل ای ڈی عام طور پر وسیع فیلڈ فلوروسینس مائیکروسکوپی میں استعمال ہوتے ہیں۔
حوصلہ افزائی فلٹر
ایکسائٹر عام طور پر ایک بینڈ پاس فلٹر ہوتا ہے جو صرف فلوروفور کے ذریعے جذب شدہ طول موج سے گزرتا ہے، اس طرح دوسرے فلوروسینٹ ذرائع سے جوش کو کم کرتا ہے اور فلوروسینس ایمیشن بینڈ میں جوش کی روشنی کو روکتا ہے۔
dichroic آئینہ
ڈیکروک فلٹر یا پتلی فلم فلٹر ایک بہت ہی درست رنگ کا فلٹر ہے جو دوسرے رنگوں کی عکاسی کرتے ہوئے رنگوں کی ایک چھوٹی رینج میں روشنی کو منتخب طور پر منعکس کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔
اخراج فلٹر۔
ایمیٹر عام طور پر ایک بینڈ پاس فلٹر ہوتا ہے جو صرف فلوروفور کے ذریعہ خارج ہونے والی طول موج سے گزرتا ہے اور اس بینڈ کے باہر تمام ناپسندیدہ روشنی کو روکتا ہے، خاص طور پر جوش کی روشنی کو۔
فلٹرز ناپسندیدہ اتیجیت توانائی (بشمول UV اور IR) یا نمونہ اور سسٹم آٹو فلوروسینس کو فلٹر کرکے کم سے کم پس منظر کو یقینی بناتے ہیں۔
